Ana Sayfa | Site Ağacı | Site Hakkında | Site İçi Arama | Bize Ulaşın  
Analitik Kimya
Anorganik Kimya
Fizikokimya
Polimer Kimyası
Organik Kimya
Genel Kimya
Enstrümental Kimya
Su ve Çevre Kimyası
Gıda Kimyası
Ambalaj Kimyası
Deney Öncesi Hazırlık
Gıda Analizleri
Yem Analizleri
Su Analizleri
Temizlik Mad. Analizleri
Diastaz Sayısı Tayini

Diastaz sayısı tayini

Bu tayinde kullanılacak bal numunesi, ön ısıtmaya tabi tutulmamalıdır.

Yöntemin Prensibi

Miktarı bilinen bal örneği, konsantrasyonu belli nişasta çözeltisi ile karıştırılarak sabit sıcaklıkta tutulur. Baldaki diastaz enzimi ile nişasta hidroliz olur. Şartları ve süresi bu deneyde belirtilen hidroliz olayından sonra, geriye kalan hidroliz olmamış nişasta, iyot çözeltisi ile muamele edilerek renkli bir komplekse dönüştürülür.

Farklı hacimlerde nişasta çözeltileri aynı işleme tabi tutularak, 1 g balın tamamen hidroliz edebildiği nişasta çözeltisi hacmi hesaplanır.

Kullanılan Malzemeler

Balonjoje (500 mL,1000 mL)
Erlen (250 mL)
Beher (100 mL, 2 L)
Filtre kağıdı
Huni
Deney tüpü
Mezür (100 mL)

Pipet(5 ,10 mL)
Su Banyosu
Terazi
pH metre

 

Pastör pipeti

Kullanılan Kimyasallar

 

0,1 N İyot çözeltisi 

Fosfat/sitrat tamponu: Sitrik asit monohidrat çözeltisi: 21,01 g sitrik asit monohidrat (C6H8O7.H2O) yeterli hacimde saf suda çözdürüldükten sonra son hacim 1 L’ye saf su tamamlanır.

Disodyum hidrojen fosfat dihidrat çözeltisi: 35,60 g disodyum hidrojen fosfat dihidrat (Na2HPO4.2H2O), yeterli hacimde saf suda çözdürüldükten sonra son hacim 1 L’ye saf su tamamlanır.

0,5 N (yaklaşık) Hidroklorik asit çözeltisi: Yoğunluğu 1,19 g/mL olan derişik hidroklorik asitten alınan 1 hacim asit, 23 hacim su ile seyreltilerek yaklaşık 0,5 N çözelti hazırlanır.

Sodyum hidroksit çözeltisi (0,5 M): 20 g sodyum hidroksit (NaOH), tam olarak tartılır ve 1L lik ölçülü bir balonda çözüldükten sonra hacim, su ile 1L ye tamamlanır ve iyice karıştırılır.

Fosfat/sitrat tamponunun hazırlanması: Sitrik asit çözeltisinin 469 mL , 2 litrelik bir behere konur ve fosfat çözeltisinin 531 mL si ile karıştırılır. Beher, bir magnetik karıştırıcı üzerine yerleştirilir. Çözelti içine uygun büyüklükte bir magnet çubuğu konarak magnetik karıştırıcı ile orta hızda karıştırılır. pHmetrenin kalibrasyonu yapıldıktan sonra cam elektrod çözelti içine daldırılır.İki ayrı bürete, hidroklorik asit çözeltisi ve sodyum hidroksit çözeltisi doldurulur. Beherdeki karışımın pH sı 5.2 den büyük ise hidroklorik asit çözeltisi ile, aksine 5.2 den küçük ise sodyum hidroksit çözeltisi ile titre edilerek, pH değeri tam 5.2 ye ayarlanır. Böylece elde edilen çözeltiye fosfat/sitrat tamponu denir. Çözelti en çok 2 hafta kullanılabilir.

Sodyum klorür çözeltisi, (0,1 N): 2,93 g sodyum klorür (NaCl), 500 mL lik ölçülü bir balonda bir miktar su ile çözülür ve hacim su ile 500 mL  ye tamamlanır.

Nişasta çözeltisi: Diastaz sayısı tayini için uygun nitelikte, suda tamamen çözünebilir nişastadan 1 g lık bir tartım alınarak 250 mL lik bir erlende 60 mL su ile karıştırılır. Karışım, hızla kaynama noktasına kadar ısıtılır.

Isıtma esnasında erlen, boyun kısmından tutularak mümkün olduğu kadar hızla döndürülür. Isıtma hızıdüşürülür ve 3 dakika süre ile kaynatmaya devam edilir. Erlenin ağzı kapatılır ve oda sıcaklığında soğuması beklenir. Kantitatif olarak 100 mL lik ölçülü bir balona alınır ve işaret çizgisine kadar seyreltilir. Bu nişasta çözeltisinin iyot ile verdiği kompleksin rengindeki değişmenin asgaride kalması bakımından, burada verilen çözelti hazırlama işlemlerine aynen uyulmalıdır.

Nişasta + tampon karışımı: Fosfat/sitrat tampon çözeltisinin  40 mL si 250 mL lik bir erlende 100 mL nişasta çözeltisi ve 20 mL 0,1 N sodyum klorür çözeltisi ile karıştırılır. Karışım, kaba gözenekli (siyah bandlı) süzgeç kağıdından süzülür. Süzüntü, temiz, kuru ve ağzı iyikapanan bir şişeye konularak saklanır ve 2 günden sonra yenilenir.

Bal çözeltisinin hazırlanması

Ön ısıtma işlemine tabi tutulmuş 10 g bal, tartılır ve uygun bir beherde, (40 - 50) mL kadar damıtık suda çözülür. Karışım, kantitatif olarak 100 mL lik ölçülü bir balona alınır ve yine su ile işaret çizgisine kadar seyreltilir.

Hidroliz

Bir seri halinde dizilmiş ve 1.den itibaren numaralanmış 12 ayrı deney tüpüne, Çizelge 1.de verilen miktarlarda bal çözeltisi, damıtık su ve nişasta + tampon karışımı konularak bütün tüplerdeki karışım hacimlerinin 18 mL olması sağlanır.

Tüplerin her biri alt üst edilerek iyice karıştırılır. Sonra, su banyosunun tüp taşıyıcısına sırası bozulmadan yerleştirilir. Su banyosunun sıcaklığı (38 - 40)ºC'a ayarlanır ve tüpler bu sıcaklıkta tam 1 saat bekletilir.

Çizelge 1.Diastaz sayısı tayininde, inkübasyon için alınacak bal çözeltisi ve reaktif hacimleri

Not - Diastaz sayısını daha hassas olarak tayin etmek için tüp sayısı 24 e veya 36 ya çıkarılabilir. Bu taktirde yukarıdaki çizelgede belirtilen bal ve destile su hacimlerini araya alacak şekilde uygun standardlar hazırlanır ve her standardın tekabül ettiği diastaz sayısı aşağıdaki eşitlikle bulunur.

Diastaz sayısı = 50/V

Burada;

V = Alınan bal çözeltisi hacmidir.

Tayin

Bir saatlik sürenin sonunda, deney tüpleri su banyosundan çıkarılır ve hemen buzlu suya batırılarak soğutulur. Her tüpe, birer damla 0,1 N iyot çözeltisi  damlatıldıktan sonra alt üst edilerek karıştırılr.

Tüpler, 1 numaralı olandan itibaren gözle incelenir. Mavilik gözlenen ilk tüp sınır olarak alınır. Bundan bir önceki deney tüpüne karşılık gelen diastaz sayısı Çizelge 1.den okunur. Bu değer, balın diastaz sayısı olarak kaydedilir.

 

 

 

 

 

 

Adobe Acrobat Reader Adobe Acrobat Reader


Belge Ziyaretçi Sayısı: 17823
Kitaplar
Tezler
Tez Arama
Sözlük
Yenilenen ORLAB katalogu için info@orlab.com.tr adresinden istekte bulunabilirsiniz.
Ayrıntılar




NMR kimyasalları hakkında herşey www.nmrkimyasallari.com
Ayrıntılar




LabSafe Laboratuvar ve İş Güvenliği Kataloğu
Ayrıntılar




Merck Laboratuvar El Kitabı II. baskısı çıktı.
Ayrıntılar




 
Son Eklenen Belge Tarihi: 07.08.2021 • Toplam Ziyaretçi Sayısı : 25025457
Her hakkı saklıdır © Kimyaevi
 
Orlab Merck